4 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Диагностика нарушений в системе цитокинов

Оценка клеток-мишеней

1. Определение экспрессии рецепторов цитокинов на уровне генов и белковой молекулы (ПЦР, метод проточной цитофлуориметрии).

2. Определение сигнальных молекул во внутриклеточном содержимом.

3. Определение функциональной активности клеток-мишеней.

В настоящее время разработаны многочисленные методы оценки системы цитокинов, которые дают разноплановую информацию. Среди них различают:

1) молекулярно-биологические методы;

2) методы количественного определения цитокинов с помощью иммуноанализа;

3) тестирование биологической активности цитокинов;

4) внутриклеточное окрашивание цитокинов;

5) метод ELISPOT, позволяющий выявить цитокины вокруг единичной цитокинпродуцирующей клетки;

С помощью молекулярно-биологических методовможно исследовать экспрессию генов цитокинов, их рецепторов, сигнальных молекул, изучать полиморфизм указанных генов. В последние годы выполнено большое число работ, выявивших ассоциации между вариантами аллелей генов молекул системы цитокинов и предрасположенностью к ряду заболеваний. Изучение аллельных вариантов генов цитокинов может дать информацию о генетически запрограммированной продукции того или иного цитокина. Наиболее чувствительной считается полимеразная цепная реакция в реальном времени — ПЦР-РВ. Метод гибридизации in situ позволяет уточнить тканевую и клеточную локализацию экспрессиии цитокиновых генов.

Количественное определение цитокинов в биологических жидкостях методом ИФА. Уровни цитокинов в сыворотке или других биологических жидкостях отражают текущее состояние иммунной системы, т.е. синтез цитокинов клетками организма in vivo [6].

Определение уровней продукции цитокинов мононуклеарами периферической крови (МНК) показывает функциональное состояние клеток. Спонтанная продукция цитокинов МНК в культуре свидетельствует, что клетки уже активированы in vivo. Индуцированный (различными стимуляторами, митогенами) синтез цитокинов отражает потенциальную, резервную способность клеток отвечать на антигенный стимул (в частности, на действие лекарственных препаратов). Сниженная индуцированная продукция цитокинов может служить одним из признаков иммунодефицитного состояния. Цитокины не специфичны в отношении конкретного антигена. Поэтому специфическая диагностика инфекционных, аутоиммунных и аллергических заболеваний с помощью определения уровня тех или иных цитокинов невозможна. В то же время оценка уровней цитокинов позволяет получить данные о тяжести воспалительного процесса, его переходе на системный уровень и прогнозе, функциональной активности клеток иммунной системы [3].

Биологическое тестированиепроводят на основе знания основных свойств цитокинов, их действия на клетки-мишени. Изучение биологических эффектов цитокинов позволило разработать четыре разновидности тестирования цитокинов:

1) по индукции пролиферации клеток-мишеней;

2) по цитотоксическому эффекту;

3) по индукции дифференцировки костно-мозговых предшественников;

4) по противовирусному действию.

ИЛ-1 определяют по стимулирующему действию на пролиферацию мышиных тимоцитов, активированных митогеном in vitro; ИЛ-2 — по способности стимулировать пролиферативную активность лимфобластов; по цитотоксическому действию на мышиные фибробласты тестируют ФНОа и лимфотоксины. Колониестимулирующие факторы оценивают по их способности поддерживать рост костномозговых предшественников в виде колоний в агаре. Противовирусную активность ИФН выявляют по угнетению цитопатического действия вирусов в культуре диплоидных фибробластов человека и опухолевой линии фибробластов мышей [7].

Внутриклеточное окрашивание цитокинов.Методом внутриклеточного окрашивания определяют экспрессию цитокина на уровне одной клетки. Проточная цитофлуориметрия позволяет подсчитать количество клеток, экспрессирующих тот или иной цитокин.

Основные этапы определения внутриклеточных цитокинов:

Нестимулированные клетки продуцируют небольшие количества цитокинов, которые, как правило, не депонируются, поэтому важным этапом оценки внутриклеточных цитокинов являются стимуляция лимфоцитов и блокада выхода этих продуктов из клеток.

В качестве индуктора цитокинов чаще всего используют активатор протеинкиназы С форбол-12-миристат-13-ацетат (ФМА) в комбинации с ионофором кальция иономицином (ИН). Применение такого сочетания вызывает синтез широкого спектра цитокинов: ИФНу, ИЛ-4, ИЛ-2, ФНОα.

Мононуклеарные клетки инкубируют в присутствии индукторов продукции цитокинов и блокатора их внутриклеточного транспорта брефельдина А или моненсина в течение 2-6 ч.

Затем клетки ресуспендируют в буферном растворе. Для фиксации добавляют 2% формальдегид, инкубируют 10-15 мин при комнатной температуре.

Потом клетки обрабатывают сапонином, который повышает проницаемость клеточной мембраны, и окрашивают моноклональными антителами, специфичными к определяемым цитокинам. Предварительное окрашивание поверхностных маркеров (CD4, CD8) увеличивает количество получаемой информации о клетке и позволяет более точно определить ее популяционную принадлежность.

188.64.170.220 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)

очень нужно

Способ диагностики нарушения цитокинового баланса организма человека

Владельцы патента RU 2463609:

Изобретение относится к медицине и описывает способ диагностики нарушения цитокинового баланса организма человека, где устанавливают значения индексов интерлейкинов как отношения параметров про- и противовоспалительных фракций в сыворотке крови к референтным значениям, определяют средние арифметические для каждой фракции, расчет интегрального цитокинового индекса Иц (усл.ед) осуществляют по формуле: ИЦ1+(И2-1), где И1 — среднее арифметическое значение индексов провоспалительных интерлейкинов, И2 — среднее арифметическое значение индексов противовоспалительных интерлейкинов, и при значениях ИЦ ≤1 констатируют оптимальный баланс цитокинов, при ИЦ>1 — его нарушение (усиление воспалительных процессов). Способ обеспечивает повышение точности и достоверности оценки цитокинового баланса организма и воспалительных изменений. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, точнее к иммунологии и лабораторной диагностике, и может быть использовано для ранней диагностики воспалительных процессов и определения реактивности иммунной системы организма на основе оценки соотношения про- и противовоспалительных цитокинов.

Целью изобретения является повышение точности и достоверности оценки цитокинового баланса организма и воспалительных изменений. Преимущество разработанного способа — возможность интегрального количественного выражения активности цитокинового звена воспаления, с учетом направленности действия его фракций, что позволяет объективно оценить степень отклонений в иммунной системе, в том числе на доклинических стадиях.

Способ включает в себя определение иммуноферментным методом в сыворотке крови с применением тест-систем уровней провоспалительных (ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-1β) и противовоспалительных цитокинов (ИЛ-4; ИЛ-8), установление значений индексов интерлейкинов как отношений их концентраций к референтным значениям (в зависимости от используемой тест-системы), расчет интегрального цитокинового индекса (ИЦ) в усл. ед. по формуле:

Читать еще:  Боли в спине рак и лечение метастаз

где И1 — среднее арифметическое значение индексов провоспалительных интерлейкинов, И2 — среднее арифметическое значение индексов противовоспалительных интерлейкинов.

По значению ИЦ устанавливают цитокиновый баланс и при значениях ИЦ≤1 констатируют оптимальный баланс цитокинов (отсутствие воспалительного процесса), при ИЦ>1 — его нарушение (усиление воспалительных процессов), включая ранние изменения.

Технический результат — определение соотношения про- и противовоспалительных интерлейкинов, имеющее диагностическое и прогностическое значение в оценке дисфункции иммунной защиты, в том числе на ранних стадиях развития патологии.

Согласно современным научным данным цитокины играют ключевую роль в регуляции иммунного ответа и процессов воспаления. По доминирующему биологическому действию выделяют группу провопалительных цитокинов (интерлейкины ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-1β и др.), которые принимают участие в индукции и дальнейшем развитии процессов воспаления и тканевого повреждения. Противовоспалительные цитокины, в частности (ИЛ-4, ИЛ-10) являются их антагонистами, способствующими пролиферации В- и Т-клеток, относящихся к различным субпопуляциям [1]. Вместе с тем, при избытке противовоспалительных интерлейкинов отмечается эозионофилия, накопление тучных клеток, активация синтеза IgG4 и IgE [2].

Соотношение вышеперечисленных ингредиентов крайне существенно для определения нарушений равновесия цитокиновой системы на разных стадиях.

Близким к заявленному является «Способ оценки противовоспалительной активности цитокинов» [3], включающий определение ингибирования супероксидных радикалов в модельной системе гемоглобин-пероксид водорода-люминол при добавлении оцениваемого цитокина с регистрацией показателя интенсивности хемилюминесценции, и при его снижении на 50% и более относительно исходного уровня оценивают активность цитокина как противовоспалительную. Недостатком способа является односторонний подход к определению активности цитокинового звена с учетом только противовоспалительного действия и невозможность определения цитокинового баланса в организме.

Наиболее близкий по технической сущности — Способ диагностики воспалительного процесса при раннем ревматоидном артрите [4], который осуществляется путем определения экспрессии мРНК генов цитокинов ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-17, ИЛ-1β периферической крови или синовиальной жидкости методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с регистрацией накопления продуктов реакции и оценкой баланса цитокинов по их флюоресценции по формуле: ИЛ’/ИЛ”=Е ИЛ”^Ct”/Е ИЛ’^Ct’, где ИЛ’ — концентрация мРНК гена цитокина, характеризующийся повышенной экспрессией, ИЛ” — концентрация мРНК гена цитокина, характеризующийся пониженной экспрессией, Е — эффективность амплификации, Ct’ и Ct” — значение пороговых циклов для соответствующего цитокина, с последующим расчетом парного баланса экспрессии различных цитокинов, исходя из их функциональной взаимосвязи, констатацией наличия воспалительного процесса при получении следующих балансов: ИЛ-2/ИЛ-4>10; ИЛ-1β/ИЛ-4>5000; ИЛ-8/ИЛ-4>1000 и пр. Способ учитывает обе стороны функционирования цитокинов, однако не позволяет провести интегральную оценку их взаимного влияния в сети цитокинового каскада. Кроме того, способ не учитывает изменение направленности действия противовоспалительных цитокинов при их нормальном содержании и в избытке.

Целью изобретения является большая точность и информативность оценки выраженности воспалительных процессов на основе диагностики ранних нарушений цитокинового баланса человека.

Цель достигается определением концентрации интерлейкинов в сыворотке крови (в пг/мл) иммуноферментным методом с применением тест-систем и последующим установлением индексов интерлейкинов как отношений их параметров к референтным значениям (в зависимости от используемой тест-системы), расчетом среднего арифметического для про-(ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-1β) и противовоспалительных (ИЛ-4; ИЛ-8) цитокинов и установлением интегрального цитокинового индекса (ИЦ) в усл.ед. по формуле: ИЦ1+(И2-1).

По значению Иц определяют соотношение двух разнонаправленных фракций цитокинов и при значениях Иц≤1 констатируют оптимальный баланс цитокинов, свидетельствующий об отсутствии воспалительного процесса, при ИЦ>1 — его изменение (усиление воспалительных процессов).

Способ позволяет установить как индивидуальные изменения цитокинового баланса организма, отражающие глубину формирования воспалительного процесса, в том числе на ранних стадиях, так и его состояние в равновесных группах для объективизации лечебно-профилактических комплексов по результатам обследования различных контингентов взрослого и детского населения.

В сравнении со способом прототипа предлагаемый способ является более точным и информативным, так как базируется на интегральной оценке, наиболее полно отражающей состояние цитокиновой системы, что существенно при установлении степени риска для здоровья.

Применение способа иллюстрируется следующими примерами.

Примеры выполнения способа

С целью диагностики фазы воспалительного процесса у больного Г., 38 лет, страдающего начальными проявлениями хронического пылевого бронхита, обусловленного воздействием цементной пыли, проведено иммунологическое обследование с определением уровней интерлейкинов сыворотки.

Согласно полученным данным:

Референтные значения при выбранном способе их определения в сыворотке крови составляют соответственно: ИЛ-1β=11 пг/мл; ИЛ-2=10 пг/мл; ИЛ-4=4 пг/мл; ИЛ-6=10 пг/мл; ИЛ-8=10 пг/мл; ИЛ-10=31 пг/мл.

Индексы интерлейкинов составляют:

— И ИЛ-1β=0,98 усл.ед.;

Значение И1=(И ИЛ-1β+И ИЛ-2+И ИЛ-6+И ИЛ-8)/4=(0,98+1,31+1,25+1,13)/4=1,17.

Значение И2=(И ИЛ-4+И ИЛ-10)/2=(0,97+1,1)/2=1,035.

Расчет интегрального цитокинового индекса проведен следующим образом:

В результате интегральный цитокиновый индекс составил 1,2, что выше 1 и свидетельствовало об начальных проявлениях воспалительного процесса. Полученные данные аргументировали необходимость коррекции лечебных мероприятий у данного больного.

При определении способом прототипа парного соотношения цитокинов получены следующие результаты: ИЛ-1β/ИЛ-4=2,77; ИЛ-2/ИЛ-4=3,36; ИЛ-6/ИЛ-4=3,2; ИЛ-8/ИЛ-4=2,9. Следовательно, при оценке уровня воспалительного процесса не выявлено превышение пороговых значений, что не позволяет констатировать наличие его нарастания.

Таким образом, определение цитокинового соотношения различными способами — предлагаемым и способом-прототипом, привело к разным заключениям. По сравнению со способом-прототипом, разработанный способ более чувствителен и информативен при воспалительных процессах слабой степени выраженности, что особенно значимо для ранней диагностики.

Эффективность предлагаемого способа оценена после проведения больному лечебно-профилактического комплекса противовоспалительной физио- и медикаментозной терапии.

Концентрации интерлейкинов сыворотки крови составили: ИЛ-1β=6,7 пг/мл; ИЛ-2=10,5 пг/мл; ИЛ-4=3,1 пг/мл; ИЛ-6=10,7 пг/мл; ИЛ-8=8,6 пг/мл; ИЛ-10=26,8 пг/мл.

В результате интегральный цитокиновый индекс был равен 0,7, что соответствовало оптимальному балансу цитокинов и указывало на снижение активности воспалительного процесса у данного больного.

Группу из 30 обследованных составили практически здоровые рабочие цементного производства в возрасте 24-35 лет со стажем работы во вредных условиях до 10 лет. В результате иммунологического обследования у 4 человек (13,3%) интегральный цитокиновый индекс ИЦ превышал 1 (среднее значение 1,36±0,35). У 86,7% обследованных данный показатель не превышал установленных пределов (среднее значение 0,76±0,12). Таким образом, выявленные у части рабочих изменения послужили обоснованием для углубленного обследования и проведения лечебно-профилактических мероприятий по показаниям.

Читать еще:  Камни в предстательной железе лечение лазером

При определении выраженности воспалительного процесса способом-прототипом установлены нормальные значения парного соотношения цитокинов у всех обследованных. Средние значения парного баланса цитокинов составили: ИЛ-2/ИЛ-4=4,6±1,3; ИЛ-1β/ИЛ-4=1,7±0,7; ИЛ-8/ИЛ-4=4,1±1,5, что не дало оснований для выделения среди рабочих «группы риска» и проведения соответствующих профилактических мероприятий.

Таким образом, групповое обследование, проведенное предлагаемым способом, по сравнению со способом-прототипом, дало более дифференцированную оценку наличия воспалительных изменений, требующих адекватных лечебно-профилактических мероприятий.

1. Бережная Н.М. Цитокиновая регуляция при патологии: стремительное развитие и неизбежные вопросы // Журнал «Цитокины и воспаление». — 2007. — №2. — С.3-8.

2. Железникова Г.Ф. Цитокины как предикторы течения и исхода инфекций // Журнал «Цитокины и воспаление». — 2009. — №1. — С.10-17.

3. Описание изобретения к патенту RU 2150113 С1. Способ оценки противовоспалительной активности цитокинов, опубликованному 27.05.2000. Авторы: Еричев В.П., Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Василенкова Л.В., Клебанов Г.И., Долгига Е.Н., Никанкина Л.В.

4. Описание изобретения к патенту RU 2417263 С2. Способ диагностики воспалительного процесса при раннем ревматоидном артрите, опубликованному 27.04.2011. Авторы: Ребриков Д.В., Бурменская О.В., Трофимов Д.Ю.

Способ диагностики нарушения цитокинового баланса организма человека, отличающийся тем, что устанавливают значения индексов интерлейкинов как отношения параметров про- и противовоспалительных фракций в сыворотке крови к референтным значениям, определяют средние арифметические для каждой фракции, расчет интегрального цитокинового индекса Иц (усл.ед) осуществляют по формуле Иц1+(И2-1), где И1 — среднее арифметическое значение индексов провоспалительных интерлейкинов, И2 — среднее арифметическое значение индексов противовоспалительных интерлейкинов, и при значениях Иц ≤1 констатируют оптимальный баланс цитокинов, при Иц>1 — его нарушение (усиление воспалительных процессов).

Способ диагностики нарушения цитокинового баланса организма человека

Владельцы патента RU 2463609:

Изобретение относится к медицине и описывает способ диагностики нарушения цитокинового баланса организма человека, где устанавливают значения индексов интерлейкинов как отношения параметров про- и противовоспалительных фракций в сыворотке крови к референтным значениям, определяют средние арифметические для каждой фракции, расчет интегрального цитокинового индекса Иц (усл.ед) осуществляют по формуле: ИЦ1+(И2-1), где И1 — среднее арифметическое значение индексов провоспалительных интерлейкинов, И2 — среднее арифметическое значение индексов противовоспалительных интерлейкинов, и при значениях ИЦ ≤1 констатируют оптимальный баланс цитокинов, при ИЦ>1 — его нарушение (усиление воспалительных процессов). Способ обеспечивает повышение точности и достоверности оценки цитокинового баланса организма и воспалительных изменений. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, точнее к иммунологии и лабораторной диагностике, и может быть использовано для ранней диагностики воспалительных процессов и определения реактивности иммунной системы организма на основе оценки соотношения про- и противовоспалительных цитокинов.

Целью изобретения является повышение точности и достоверности оценки цитокинового баланса организма и воспалительных изменений. Преимущество разработанного способа — возможность интегрального количественного выражения активности цитокинового звена воспаления, с учетом направленности действия его фракций, что позволяет объективно оценить степень отклонений в иммунной системе, в том числе на доклинических стадиях.

Способ включает в себя определение иммуноферментным методом в сыворотке крови с применением тест-систем уровней провоспалительных (ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-1β) и противовоспалительных цитокинов (ИЛ-4; ИЛ-8), установление значений индексов интерлейкинов как отношений их концентраций к референтным значениям (в зависимости от используемой тест-системы), расчет интегрального цитокинового индекса (ИЦ) в усл. ед. по формуле:

где И1 — среднее арифметическое значение индексов провоспалительных интерлейкинов, И2 — среднее арифметическое значение индексов противовоспалительных интерлейкинов.

По значению ИЦ устанавливают цитокиновый баланс и при значениях ИЦ≤1 констатируют оптимальный баланс цитокинов (отсутствие воспалительного процесса), при ИЦ>1 — его нарушение (усиление воспалительных процессов), включая ранние изменения.

Технический результат — определение соотношения про- и противовоспалительных интерлейкинов, имеющее диагностическое и прогностическое значение в оценке дисфункции иммунной защиты, в том числе на ранних стадиях развития патологии.

Согласно современным научным данным цитокины играют ключевую роль в регуляции иммунного ответа и процессов воспаления. По доминирующему биологическому действию выделяют группу провопалительных цитокинов (интерлейкины ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-1β и др.), которые принимают участие в индукции и дальнейшем развитии процессов воспаления и тканевого повреждения. Противовоспалительные цитокины, в частности (ИЛ-4, ИЛ-10) являются их антагонистами, способствующими пролиферации В- и Т-клеток, относящихся к различным субпопуляциям [1]. Вместе с тем, при избытке противовоспалительных интерлейкинов отмечается эозионофилия, накопление тучных клеток, активация синтеза IgG4 и IgE [2].

Соотношение вышеперечисленных ингредиентов крайне существенно для определения нарушений равновесия цитокиновой системы на разных стадиях.

Близким к заявленному является «Способ оценки противовоспалительной активности цитокинов» [3], включающий определение ингибирования супероксидных радикалов в модельной системе гемоглобин-пероксид водорода-люминол при добавлении оцениваемого цитокина с регистрацией показателя интенсивности хемилюминесценции, и при его снижении на 50% и более относительно исходного уровня оценивают активность цитокина как противовоспалительную. Недостатком способа является односторонний подход к определению активности цитокинового звена с учетом только противовоспалительного действия и невозможность определения цитокинового баланса в организме.

Наиболее близкий по технической сущности — Способ диагностики воспалительного процесса при раннем ревматоидном артрите [4], который осуществляется путем определения экспрессии мРНК генов цитокинов ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-17, ИЛ-1β периферической крови или синовиальной жидкости методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с регистрацией накопления продуктов реакции и оценкой баланса цитокинов по их флюоресценции по формуле: ИЛ’/ИЛ”=Е ИЛ”^Ct”/Е ИЛ’^Ct’, где ИЛ’ — концентрация мРНК гена цитокина, характеризующийся повышенной экспрессией, ИЛ” — концентрация мРНК гена цитокина, характеризующийся пониженной экспрессией, Е — эффективность амплификации, Ct’ и Ct” — значение пороговых циклов для соответствующего цитокина, с последующим расчетом парного баланса экспрессии различных цитокинов, исходя из их функциональной взаимосвязи, констатацией наличия воспалительного процесса при получении следующих балансов: ИЛ-2/ИЛ-4>10; ИЛ-1β/ИЛ-4>5000; ИЛ-8/ИЛ-4>1000 и пр. Способ учитывает обе стороны функционирования цитокинов, однако не позволяет провести интегральную оценку их взаимного влияния в сети цитокинового каскада. Кроме того, способ не учитывает изменение направленности действия противовоспалительных цитокинов при их нормальном содержании и в избытке.

Читать еще:  Киста простаты у мужчин симптомы эффективное лечение

Целью изобретения является большая точность и информативность оценки выраженности воспалительных процессов на основе диагностики ранних нарушений цитокинового баланса человека.

Цель достигается определением концентрации интерлейкинов в сыворотке крови (в пг/мл) иммуноферментным методом с применением тест-систем и последующим установлением индексов интерлейкинов как отношений их параметров к референтным значениям (в зависимости от используемой тест-системы), расчетом среднего арифметического для про-(ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-1β) и противовоспалительных (ИЛ-4; ИЛ-8) цитокинов и установлением интегрального цитокинового индекса (ИЦ) в усл.ед. по формуле: ИЦ1+(И2-1).

По значению Иц определяют соотношение двух разнонаправленных фракций цитокинов и при значениях Иц≤1 констатируют оптимальный баланс цитокинов, свидетельствующий об отсутствии воспалительного процесса, при ИЦ>1 — его изменение (усиление воспалительных процессов).

Способ позволяет установить как индивидуальные изменения цитокинового баланса организма, отражающие глубину формирования воспалительного процесса, в том числе на ранних стадиях, так и его состояние в равновесных группах для объективизации лечебно-профилактических комплексов по результатам обследования различных контингентов взрослого и детского населения.

В сравнении со способом прототипа предлагаемый способ является более точным и информативным, так как базируется на интегральной оценке, наиболее полно отражающей состояние цитокиновой системы, что существенно при установлении степени риска для здоровья.

Применение способа иллюстрируется следующими примерами.

Примеры выполнения способа

С целью диагностики фазы воспалительного процесса у больного Г., 38 лет, страдающего начальными проявлениями хронического пылевого бронхита, обусловленного воздействием цементной пыли, проведено иммунологическое обследование с определением уровней интерлейкинов сыворотки.

Согласно полученным данным:

Референтные значения при выбранном способе их определения в сыворотке крови составляют соответственно: ИЛ-1β=11 пг/мл; ИЛ-2=10 пг/мл; ИЛ-4=4 пг/мл; ИЛ-6=10 пг/мл; ИЛ-8=10 пг/мл; ИЛ-10=31 пг/мл.

Индексы интерлейкинов составляют:

— И ИЛ-1β=0,98 усл.ед.;

Значение И1=(И ИЛ-1β+И ИЛ-2+И ИЛ-6+И ИЛ-8)/4=(0,98+1,31+1,25+1,13)/4=1,17.

Значение И2=(И ИЛ-4+И ИЛ-10)/2=(0,97+1,1)/2=1,035.

Расчет интегрального цитокинового индекса проведен следующим образом:

В результате интегральный цитокиновый индекс составил 1,2, что выше 1 и свидетельствовало об начальных проявлениях воспалительного процесса. Полученные данные аргументировали необходимость коррекции лечебных мероприятий у данного больного.

При определении способом прототипа парного соотношения цитокинов получены следующие результаты: ИЛ-1β/ИЛ-4=2,77; ИЛ-2/ИЛ-4=3,36; ИЛ-6/ИЛ-4=3,2; ИЛ-8/ИЛ-4=2,9. Следовательно, при оценке уровня воспалительного процесса не выявлено превышение пороговых значений, что не позволяет констатировать наличие его нарастания.

Таким образом, определение цитокинового соотношения различными способами — предлагаемым и способом-прототипом, привело к разным заключениям. По сравнению со способом-прототипом, разработанный способ более чувствителен и информативен при воспалительных процессах слабой степени выраженности, что особенно значимо для ранней диагностики.

Эффективность предлагаемого способа оценена после проведения больному лечебно-профилактического комплекса противовоспалительной физио- и медикаментозной терапии.

Концентрации интерлейкинов сыворотки крови составили: ИЛ-1β=6,7 пг/мл; ИЛ-2=10,5 пг/мл; ИЛ-4=3,1 пг/мл; ИЛ-6=10,7 пг/мл; ИЛ-8=8,6 пг/мл; ИЛ-10=26,8 пг/мл.

В результате интегральный цитокиновый индекс был равен 0,7, что соответствовало оптимальному балансу цитокинов и указывало на снижение активности воспалительного процесса у данного больного.

Группу из 30 обследованных составили практически здоровые рабочие цементного производства в возрасте 24-35 лет со стажем работы во вредных условиях до 10 лет. В результате иммунологического обследования у 4 человек (13,3%) интегральный цитокиновый индекс ИЦ превышал 1 (среднее значение 1,36±0,35). У 86,7% обследованных данный показатель не превышал установленных пределов (среднее значение 0,76±0,12). Таким образом, выявленные у части рабочих изменения послужили обоснованием для углубленного обследования и проведения лечебно-профилактических мероприятий по показаниям.

При определении выраженности воспалительного процесса способом-прототипом установлены нормальные значения парного соотношения цитокинов у всех обследованных. Средние значения парного баланса цитокинов составили: ИЛ-2/ИЛ-4=4,6±1,3; ИЛ-1β/ИЛ-4=1,7±0,7; ИЛ-8/ИЛ-4=4,1±1,5, что не дало оснований для выделения среди рабочих «группы риска» и проведения соответствующих профилактических мероприятий.

Таким образом, групповое обследование, проведенное предлагаемым способом, по сравнению со способом-прототипом, дало более дифференцированную оценку наличия воспалительных изменений, требующих адекватных лечебно-профилактических мероприятий.

1. Бережная Н.М. Цитокиновая регуляция при патологии: стремительное развитие и неизбежные вопросы // Журнал «Цитокины и воспаление». — 2007. — №2. — С.3-8.

2. Железникова Г.Ф. Цитокины как предикторы течения и исхода инфекций // Журнал «Цитокины и воспаление». — 2009. — №1. — С.10-17.

3. Описание изобретения к патенту RU 2150113 С1. Способ оценки противовоспалительной активности цитокинов, опубликованному 27.05.2000. Авторы: Еричев В.П., Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Василенкова Л.В., Клебанов Г.И., Долгига Е.Н., Никанкина Л.В.

4. Описание изобретения к патенту RU 2417263 С2. Способ диагностики воспалительного процесса при раннем ревматоидном артрите, опубликованному 27.04.2011. Авторы: Ребриков Д.В., Бурменская О.В., Трофимов Д.Ю.

Способ диагностики нарушения цитокинового баланса организма человека, отличающийся тем, что устанавливают значения индексов интерлейкинов как отношения параметров про- и противовоспалительных фракций в сыворотке крови к референтным значениям, определяют средние арифметические для каждой фракции, расчет интегрального цитокинового индекса Иц (усл.ед) осуществляют по формуле Иц1+(И2-1), где И1 — среднее арифметическое значение индексов провоспалительных интерлейкинов, И2 — среднее арифметическое значение индексов противовоспалительных интерлейкинов, и при значениях Иц ≤1 констатируют оптимальный баланс цитокинов, при Иц>1 — его нарушение (усиление воспалительных процессов).

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector